Hej, inni entuzjaści chromatografii! Jako dostawcaSzklane płytki TLC, Często zadawano mi bardzo powszechne pytanie: „Jaka jest maksymalna liczba próbek, które można uruchomić na jednej szklanej płycie TLC?” Cóż, zanurzmy się w tym temacie i rozbijmy go.
Po pierwsze, szybko omówmy, czym jest TLC lub cienki - warstwowa chromatografia. To prosta, ale potężna technika stosowana do oddzielania mieszanin. Płyta TLC jest jak etap, w którym różne elementy mieszanki pokazują ich ruchy. Szklane płytki TLC są szczególnie popularne, ponieważ są bardzo wytrzymałe i mogą poradzić sobie z dużą ilością zużycia podczas procesu chromatografii.
Teraz wracając do wielkiego pytania. Nie ma jednego - rozmiar - pasuje - wszystkie odpowiedz na maksymalną liczbę próbek na jednej szklanej płycie TLC. To zależy od kilku czynników.
Rozmiar płyty
Głównym czynnikiem jest rozmiar szklanej płyty TLC. Mamy różne rozmiary na rynku, od małych, które są przydatne w przypadku szybkich testów po większe, które mogą obsłużyć więcej próbek. Mniejsza płyta, powiedzmy, że 2,5 cm x 7,5 cm jest dość ograniczony pod względem liczby próbek, które może przechowywać. Prawdopodobnie patrzysz na maksymalnie około 3-5 próbek. To dlatego, że musisz pozostawić wystarczającą ilość miejsca między każdym miejscem próbki, aby komponenty nie zaczęły mieszać się podczas procesu separacji.
Z drugiej strony większa płyta, jak 20 cm x 20 cm, może pomieścić znacznie większą liczbę próbek. Możesz potencjalnie uruchomić na nim 15–20 próbek. Pamiętaj jednak, że tylko dlatego, że możesz dopasować tak wielu, nie zawsze oznacza, że jest to najlepszy pomysł.
Rozmiar miejsca
Ogromna rola odgrywa również rozmiar stosowanych miejsc próbek. Jeśli używasz mikropipety do nakładania próbek i robisz duże, grube plamy, zużyjesz dużo miejsca na talerzu. Mniejsze, dobrze - zdefiniowane plamy pozwalają dopasować więcej próbek. Idealnie chcesz, aby plamy miały średnicę około 2 - 3 mm. Daje to komponentom wystarczającą ilość miejsca, aby rozprzestrzenić się podczas procesu chromatografii bez zakłócania sąsiednich miejsc.
Jeśli sprawiasz, że miejsca będą zbyt duże, możesz skończyć z nakładającymi się miejscami, co pokonuje cały cel TLC. Nie będziesz w stanie wyraźnie rozróżnić komponentów różnych próbek, a twoje wyniki będą gorącym bałaganem.
Złożoność próbki
Złożoność pobieranych próbek również ma znaczenie. Jeśli pracujesz z prostymi mieszaninami, które mają tylko kilka komponentów, prawdopodobnie możesz uciec od nakładania większej liczby próbek na talerzu. Ale jeśli twoje próbki są złożone, z wieloma różnymi komponentami, rozprzestrzenią się bardziej podczas separacji. Oznacza to, że musisz pozostawić więcej miejsca między plamami próbki, zmniejszając liczbę próbek, które możesz uruchomić.
Na przykład, jeśli analizujesz czysty związek, możesz umieścić plamy bliżej siebie. Ale jeśli masz do czynienia z ekstraktem roślinnym, który zawiera całą masę różnych chemikaliów, musisz być bardziej konserwatywny z liczbą próbek.
Rozpuszczalnik rozwojowy
Rodzaj używanego rozpuszczalnika programistycznego może również wpływać na liczbę próbek na płycie. Niektóre rozpuszczalniki powodują, że komponenty rozprzestrzeniają się bardziej niż inne. Wysoce polarne rozpuszczalnik może powodować szybsze poruszanie się i rozprzestrzenianie się. W takim przypadku musisz pozostawić więcej miejsca między próbkami, zmniejszając maksymalną liczbę, którą możesz uruchomić.
Z drugiej strony mniej polarny rozpuszczalnik może spowodować bardziej kompaktowe plamy, co pozwala dopasować więcej próbek na płycie. Tak więc, kiedy planujesz eksperyment TLC, musisz wziąć pod uwagę nieruchomości rozpuszczalnika rozwojowego.
Najlepsze praktyki maksymalizacji numeru próbki
Jeśli naprawdę chcesz wcisnąć jak najwięcej próbek na jedną szklaną płytę TLC, oto kilka wskazówek. Najpierw użyj delikatnej mikropipety, aby zastosować bardzo małe, precyzyjne miejsca. Upewnij się, że talerz jest czysty, zanim zaczniesz wykrywać próbki. Wszelkie brudu lub zanieczyszczenia na płycie mogą wpływać na rozdzielenie i rozmiar plam.
Ułóż próbki w zorganizowany sposób. Możesz użyć wzoru siatki, aby upewnić się, że skutecznie używasz przestrzeni. I nie zapomnij wyraźnie oznaczyć każdego miejsca próbki. To pozwoli ci zaoszczędzić wiele bólu głowy podczas analizy wyników.
W porównaniu z aluminiowymi płytkami TLC
Być może zastanawiasz się, w jaki sposób szklane płyty TLC układają się przeciwkoAluminiowe płytki TLC. Płytki aluminiowe są bardziej elastyczne i lżejsze niż szklane płyty. Pod względem liczby próbek obowiązują te same czynniki. Jednak płytki aluminiowe mogą czasem mieć nieco bardziej porowatą powierzchnię, co może spowodować, że plamy rozprzestrzeniają się nieco. Być może konieczne może być nieco bardziej ostrożne rozmiar plamki i odstępy na aluminiowych płytach w porównaniu do szklanych.
Podsumowując, chociaż nie ma ustalonej maksymalnej liczby próbek dla pojedynczej szklanej płyty TLC, biorąc pod uwagę czynniki takie jak wielkość płyty, wielkość plamki, złożoność próbki i rozpuszczalnik rozwojowy, możesz ustalić optymalną liczbę eksperymentu. Niezależnie od tego, czy jesteś badaczem w laboratorium, ucznia uczącym się lin chromatografii, czy kogoś w branży, kluczowe jest wykorzystanie maksimum TLC.
Jeśli jesteś na rynku wysokiej jakości szklanych płyt TLC lub masz pytania dotyczące ich efektywnego korzystania, jesteśmy tutaj, aby pomóc. Zapraszam do skontaktowania się z nami, aby rozpocząć rozmowę o twoich specyficznych potrzebach i tym, jak możemy pomóc w podróży chromatograficznej.
Odniesienia
- Snyder, LR, Kirkland, JJ, i GlaJch, JL (2010). Praktyczne opracowanie metod HPLC. Wiley.
- Fried, B. i Sherma, J. (red.). (2004). Podręcznik cienkiej chromatografii warstwowej. Marcel Dekker.